19821269230
产品目录
怎样选择色谱柱
发布日期:04-28
如何选择色谱柱？
色谱柱是色谱分析法中的重要组成部分，选择合适的色谱柱对于提高分析结果的准确性和可靠性具有重要意义。以下是选择色谱柱时需要考虑的因素以及注意事项：
根据分析任务选择色谱柱类型。例如，对于成分含量分析，需要根据分析规模选择分析柱或制备柱等。
根据样品的物理和化学性质选择合适的色谱柱填料。例如，对于脂溶性样品，可以选择调料式的孔径，而对于水溶性非离子型样品，则应选择反向色谱柱等。
选择耐受pH范围符合分析条件要求的色谱柱填料。如果色谱柱填料无法耐受分析条件的pH值，可能会导致键合相水解或硅胶溶解等现象，影响分析结果。
根据样品的分子量选择适合的孔径和粒径的色谱柱。一般情况下，样品分子量小于2000时，可以选择孔径80-180Å的色谱柱，而分子量大于2000时，则应选择孔径大于300Å的色谱柱。
根据需要的载碳量选择合适的色谱柱。高载碳量有利于不易保留化合物的分离，而低载碳量则有利于分析有一定保留的化合物。
选择封端的硅胶键合相填料时，应注意其封端技术对色谱柱效能的影响。
此外，在选择色谱柱时还需注意以下几点：
应选择经过严格质量控制的色谱柱，确保其性能稳定、可靠。
应根据实际需要选择合适长度和内径的色谱柱，以达到最佳的分离效果和最佳的流速控制。
在使用色谱柱前，应先进行适当的维护和清洗，以保证其正常工作和使用寿命。
在使用过程中，应注意避免色谱柱受到机械损伤或高温等极端条件的影响，以免影响其性能和使用寿命。
色谱填料相关
在现代高效液相色谱(HPLC)中，色谱填料的选择在很大程度上取决于色谱填料的选择。然而，色谱填料的选择范围很广，要做出适当的选择，必须对此有一定的了解。填料一般分为硅胶基填料，聚合物填料与其他无机填料
硅胶基填料
1.正常相色谱
在正常相色谱中使用的固定相通常是硅胶(Silica)，以及其他具有极性官能团的相填料，如胺基(NH2，APS)和氰基(CN，CPS)。由于Silica表面硅羟基(SiOH)等基团的强极性，分离顺序是根据样品中各组分的极性大小而定，即先将强组分和弱组分的极性冲刷掉。
流动相极性低于正乙烷(Hexane)、Chloroform(Chloroform)、二氯甲烷(MethyleneChloride)等固定相。
2.反相色谱
反相色谱填料通常以硅胶为基础，键合相表面存在相对较弱的极性官能团。反相色谱所用的流动相极性较强，通常是水、缓冲液和甲醇、己酸等的混合物。
从柱中流出样品的顺序是，较强的极性组合是第一个被洗掉的，而较弱的极性组分在柱上的保留能力较强。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料
大多数聚合物调味品为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚丙酸甲酯，其主要优点是可在PH值为1～14时使用。与基于硅胶的C18填料相比，这些填料具有更强的疏水性；大孔聚合物填料对蛋白质和其他样品的分离非常有效。
聚合物填料的缺点是柱效率低于硅胶基填料。
三、其他无机填料
其他HPLC无机填料柱也已商业化。由于其特殊性，一般只限于特殊目的。例如，石墨化碳也被用作反色谱填料。石墨化碳的表面是保持的基础，不需要其他的表面改性。柱填料一般优于烷基键合硅胶或多孔聚合物填料。石墨化碳可以用来分离一些几何导体，因为HPLC流动相不会被溶解，这种柱可以在任何PH和任何温度下使用。氧化铝也可用于高效液相色谱法，氧化铝颗粒具有较强的刚性，可制成稳定的柱床。其优点是可用于PH高达12的流动相。但由于氧化铝与碱性化合物的相互作用较强，应用范围有限，因此新型的氧化锆填料也可用于高效液相色谱法，商业多孔氧化锆微球柱仅适用于聚合物涂层，新型的氧化锆填料也只适用于聚合物涂层的多孔氧化锆微球柱。当PH值为1～14时，温度可达100℃。经过多年的研究和实验的困难，氧化锆填料的重要用途和优势仍在进行中。
最后更新:08-24
相关文章:
暂无
